Plateforme de purification et analyse de protéines

Responsable: Mathieu METIFIOT

Membres de la structure:
Mathieu METIFIOT (directeur scientifique)
Christophe VELOURS (directeur technique)
Dominique BEGU

Présentation:

La plateforme propose un soutien technique à toutes les équipes de l’unité dans leurs projets de purification de protéines recombinantes. Du clonage jusqu’au contrôle qualité des préparations, nous apportons toutes les réponses à vos questions.

La plateforme possède une large gamme de colonne d’affinité ou pseudo-affinité (Ni-NTA, MBP, Strep, GST, Héparine…), hydrophobe (Butyl), ionique (Hitrap Q, Hitrap S, mono Q, mono S…) ainsi qu’une très large gamme de colonne d’exclusion stérique pouvant séparer de petits peptides (quelques kDa) jusqu’à des gros complexes macromoléculaire (20 MDa). Dans le cadre de cette activité, la plateforme purifie et met à disposition des protéines outils classiquement utilisées par les scientifiques (Sumo protéase, TEV, Taq, T7 RNA polymérase…).

Services disponibles:

Clonage, mutagenèse, expression bactérienne.

Toutes les techniques chromatographiques :
– Tamisage moléculaire
(superdex peptide/75/200; superose 6/12; HiPrep 26/10 desalting)
– Interactions ioniques
– Hydrophobes
– Affinité

Analyses sur gel en coloration directe, western blot.

Analyses biophysiques des échantillons (détermination de la masse, coefficient d’extinction, stœchiométrie, température de fusion, structures secondaires, interactions, Kd, etc.).

Appareils* :
2 incubateurs multitron (infors HT) dont 1 ventilé et 1 réfrigéré
1 centrifugeuse RC-5b Plus avec rotors SS-34, GSA et SLC-4000
1 ultracentrifugeuse Optima L-100XP avec rotors 90Ti, 45Ti, 50,2Ti et SW41Ti
1 Cell-disrupteur 10 ml
3 chaînes AKTA purifier
1 chaîne AKTA pure
1 chaîne ETTAN LC couplée à un MALLS
1 micro-calorimètre (VP-DSC)
1 BLItz
1 nanodrop 2000
1 lecteur absorbance/ELISA Apollo 1 LB911 (Berthold)
1 fluorimètre en microplaque CytoFluor II (PerSeptive Biosystems)

*soumis à réservation. Si vous n’avez pas de compte, veuillez nous contacter.